拉里是一位志大才疏的空想家，不甘心在博物馆里当守夜人，整天幻想着天降大任，能干点惊天动地的大事儿。一个神奇的夜晚，大事临头，正在值夜班的傻小子突然发现博物馆里的展品全都成了活物，暴龙的化石骨架开始晃动，史前的猛犸象标本睁开双眼，玛雅人、罗马战士、西部牛仔摆开阵势对决……

《博物馆之夜》讲述一个倒霉的博物馆保安不知不觉触动了一件文物导致一个被禁锢几千年的生物被释放了出来，带来全城的混乱。本·斯蒂勒透露欧文·威尔森将在片中扮演一个只有3英寸袖珍牛仔。